Научная электронная библиотека

Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания

1.3. G-окрашивание хромосом по длине (GTG)

G-окрашивание хромосом проводится, как правило, по общепринятому методу (Seаbright, 1971) в модификации (Захаров и др., 1982). Препараты хромосом при комнатной температуре помещают на 10–30 секунд в 0,25 % раствор трипсина, затем промывают трижды в этиловом спирте в концентрациях 70°, 96°, 100° с экспозицией не менее 30 секунд в каждом растворе. Препараты высушивают на воздухе при комнатной температуре. Для окрашивания препаратов используют 5 % раствор красителя Романовского – Гимзы (азур-эозин), приготовленный на фосфатном буфере (рН 6,8). Процедура окрашивания длится от 4 до 7 мин. Затем краситель смывают дистиллированной водой и высушивают на воздухе при комнатной температуре.

На рис. 16 представлена раскладка мужского кариотипа при окраске GTG-методом. Уровень разрешения позволяет дифференцировать 400–600 полос по длине хромосом. Уникальный рисунок каждой пары гомологов (исчерченность хромосом по длине) позволяет определить каждую хромосому (её порядковый номер) и обнаружить возможные структурные перестройки (транслокации, делеции и т.д.), а также провести подсчёт хромосом в кариотипе и обнаружить их возможные численные аномалии.

Рис. 16. Пример GTG-окрашивания хромосом по длине (нормальный мужской кариотип – 46,ХY

На другом рисунке (рис. 17) представлена раскладка дифференциально окрашеных по длине хромосом – нормальный женский кариотип (46,XX).

Рис. 17. Пример дифференциального GTG-окрашивания хромом по длине (нормальный женский кариотип – 46,XX)