Научная электронная библиотека
Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания

2.5. Методика биотестирования

Свсжевыращенная исходная культура водоросли фильтруется через 4 слоя марли и разбавляется 50% средой Тамия до оптической плотности 0,125; Полученная суспензия водорослей разливается по 1 мл пипеткой к 24 мл тестируемой пробы воды, (взятых на контрольных створах реки М. Кокшага, до слива, на сливе, после слива и контрольная проба), при этом она разбавляется в 25 раз до оптической плотности 0,005 концентрации среды Тамия 2%. В качестве контрольной пробы, используется дистиллированная вода.

Далее эта культура водоросли разливается шприцом-дозатором по 6 мл во флаконы. В каждом створе используется по 3 варианта опытов, заправленные флаконы и закрытые полиэтиленовыми пробками с отверстиями 6 мм равномерно размещаются в культиваторе. До размещения в культиваторе замеряем оптическую плотность водорослей до культивирования. Данные измерений заносятся в журнал наблюдений. Загрузка флаконов с тестируемыми пробами воды в культиватор производится через специальное окно в корпусе. Для предотвращения вытекания содержимого реакторов, приборы устанавливаются в наклонном положении. Прибор позволяет в одинаковых условиях одновременно выращивать до 18 проб водоросли и, таким образом, проводить биотестирование нескольких проб воды. После включения прибора культиватора устанавливается температура 36±0,5 градусов. Это достигается путем периодического измерения в течение 30-40 минут температуры суспензии водоросли непосредственно во флаконах с помощью электронного термодатчика прибора ИПТ-02. При несоответствии измеренной температуре необходимой ее можно повысить (поворотом вправо) или понизить (поворотом влево) с помощью ручки (T) регулятора термостатирующего устройства, выведенной на заднюю стенку культиватора.

Через 22 часа культивирования выключить культиватор, достаем из них флаконы и измеряем на приборе ИПТ-02 оптическую плотность водорослей после культивирования. Данные измерений заносятся в журнал наблюдений.

В качестве показателя токсичности образцов используется степень изменения величины прироста численности клеток тест-культуры одноклеточной, зеленой водоросли хлорелла за определенный период времени (обычно 22 часа). Прирост культуры оперативно определяется по измерению оптической плотности суспензии водоросли в начале и конце культивирования.

Характер воздействия тестируемых вод оценивается путем сравнения суточного прироста численности клеток водорослей в контрольном и опытном вариантах [11].


Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1,674