Научная электронная библиотека

Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания

1.4. С-окрашивание хромосом (СBG)

Для С-окрашивания хромосом по длине обычно используют общепринятый метод (Sumner, 1972) в модификации, разработанной в лаборатории молекулярной цитогенетики нервно-психических заболеваний ОСП НИКИ педиатрии ГОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России (Ворсанова, Демидова, 1988). Препараты хромосом обрабатывают насыщенным раствором гидроксида бария при комнатной температуре в течение 20–30 минут, затем препараты ополаскивают проточной водой и инкубируют при температуре 65 °С в растворе 10хSSС в течение 1,5 часов. Затем препараты промывают в этиловом спирте (70° и 96°), не менее 30 секунд в каждом и высушивают на воздухе. Окрашивание препаратов производится при помощи 5 % красителя Романовского – Гимзы, приготовленного на фосфатном буфере
(рН 6,8), в течение 7–8 мин.

На следующем рисунке (рис. 18) видны более тёмно окрашенные участки околоцентромерного гетерохроматина, так называемый С-гетерохроматин, после СBG-окрашивания. Заметны частичные инверсии околоцентромерного гетерохроматина в хромосомах 1 и 9 (1рhqh, 9рhqh) и увеличенный гетерохроматиновый блок в длинном плече хромосомы Y.

Рис. 18. Пример СBG-окрашивания хромосом
по длине после обработки гидроксидом бария